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0373-5128357這期病理切片廠家將為大家講解制作病理切片時染色過程中的脫水和透明。具體內(nèi)容如下:
病理切片的脫水和透明所謂脫水就是利用脫水劑將組織內(nèi)的水分置換出來,以利于有機溶劑的滲入,這一過程稱為脫水。脫水是否徹底,直接關(guān)系到組織是否能充分透明,而脫水過度(原因是組織在純酒精內(nèi)時間過久,發(fā)生組織質(zhì)地發(fā)生變化)容易造成組織發(fā)脆。
造成組織發(fā)脆的原因還有加溫(溫度超過35℃)、脫水劑內(nèi)加有丙酮、浸蠟用的石蠟中二甲苯過多等等。一般我們總認為組織發(fā)脆跟高濃度酒精有關(guān),而忽視了與低濃度的酒精關(guān)系,其實低濃度的酒精具有強大的穿透力,比純酒精更容易滲透到組織塊內(nèi)部使之脫水,組織如果在低濃度酒精里充分脫水,在高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份,因此,僅需短時間就可完成,如果這時不縮短純酒精的時間,便會引起組織發(fā)脆;如果脫水時加溫,使用丙酮,還可引起組織收縮,并影響免疫組織化學(xué)的標記。為了使石蠟浸入到組織塊內(nèi),必須經(jīng)過一種既能與脫水劑混合,又能與石蠟相溶的媒介物質(zhì),這個過程稱透明。
目前最好的透明劑是二甲苯。很多人認為二甲苯極容易使組織發(fā)脆,這個觀點很片面,在常溫下,如果不是時間過長(超過24小時以上)二甲苯并不會引起組織過份發(fā)脆,相反會使某些組織結(jié)構(gòu)比較質(zhì)韌的組織:比如子宮肌瘤等相當好切),但是當二甲苯溫度超過35℃以后,極易引起組織發(fā)脆。所以本人認為,大小標本最好分開脫水,一般情況下,大標本脫水時間(室溫18℃)以80%酒精2小時、95%酒精各1個半小時至2小時、純酒精各1個半小時至2小時,二甲苯各30-60分鐘為宜;小標本脫水時間應(yīng)相應(yīng)縮短。脫水時間長短,與室溫高低有密切的相關(guān)。我們在實踐中發(fā)現(xiàn),室溫在12~15℃時,可作為一個臨界溫度范圍。當室溫高于此溫度范圍時,組織容易脫水,可適當縮短脫水時間;而室溫低于該溫度范圍時,應(yīng)適當延長脫水時間(如能保證在一個恒定的溫度下最佳)。更換試劑,應(yīng)以量為基礎(chǔ),定量更換,不能等到切片不好時再去更換。否則,至少會有2~3批組織切片不好。根據(jù)我科經(jīng)驗,如試劑用量為500ml,每500個蠟塊更換一次為宜。
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