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0373-5128357新購買的生物玻片是不能直接使用的,需要先將玻片浸泡于95%的酒精中,這樣可去除表面附著的物質(zhì)。用之前取出晾曬活烘干備用。
使用過的舊玻片,先用肥皂水或洗衣粉水煮沸0.5h,冷卻后用軟毛刷刷掉臟物,用流水沖洗干凈后,置于95%酒精中備用。如果是石蠟切片可先放于二甲苯(可用制片時(shí)回收的廢棄二甲苯,既避免污染環(huán)境又節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本)中浸泡數(shù)小時(shí),把封片用的樹膠溶解掉,將蓋玻片和載玻片分開后,再用肥皂水煮沸。對(duì)于很臟的舊玻片可先用洗液浸泡24h(洗液配制:取重鉻酸鉀50g,加水300ml,加熱攪拌溶解,待其冷卻后,徐徐注入濃硫酸250ml,邊加邊攪拌即成,可長期使用),取出用自來水沖洗干凈后,置于95%酒精中備用。
涂片的制作
取材要快速,避免發(fā)生細(xì)胞自溶現(xiàn)象;操作要輕巧,防止損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu)。
涂片要均勻,厚薄要適度,太厚細(xì)胞堆疊,太薄細(xì)胞過少,都會(huì)影響觀察。操作時(shí),以在載玻片上涂上淡淡的一層樣品為宜。如果樣品細(xì)胞密度過大,如過濃可用生理鹽水稀釋后再做涂片。
制作血涂片時(shí),須用雙蒸水,否則易引起染料沉淀;Giemsa染液對(duì)酸堿度極敏感,當(dāng)染液偏酸時(shí),紅細(xì)胞染成紅色,偏堿時(shí)則染成藍(lán)色,所以用pH6.8―7.0的緩沖液來配制染液。
裝片的制作
制作半永久裝片,可用甘油封片。將固定、染色過的標(biāo)本放入5%甘油中,用紗布封口,放在陰涼處2―3天,使水分蒸發(fā)、甘油變濃后,吸一滴帶有標(biāo)本的甘油于載玻片上,蓋上蓋玻片。對(duì)于怕壓、易碎的標(biāo)本,可在甘油的兩邊放兩根細(xì)玻璃絲,再加蓋玻片。
制作永久裝片,一般用樹膠封片。封片前,要先將固定、染色過的標(biāo)本經(jīng)各級(jí)酒精及兩次純酒精脫水、每級(jí)15min,然后用酒精二甲苯等混液、兩次純二甲苯透明各15min。處理小型的浮游生物,在換液時(shí)可離心,使其沉淀,便于操作。