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   病理切片的制作,病理切片生產(chǎn)廠家在哪？病理切片哪家好？病理切片定制多少錢？新鄉(xiāng)市維克科教儀器有限公司主要生產(chǎn)和供應(yīng)各類臘葉浸制標(biāo)本、病理切片/動(dòng)物標(biāo)本、組胚病理切片、各規(guī)格塑料，臘葉標(biāo)本、過(guò)濾器、臘葉標(biāo)本、浸制標(biāo)本、模型、顯微鏡、切片機(jī)、電熱套等教學(xué)儀器及耗材。聯(lián)系電話：15660690681 

 病理切片的制作需要取一定大小的病變組織，用病理組織學(xué)方法制成病理切片〔通常將病變組織包埋在石蠟塊里，用切片機(jī)切成薄片，再用蘇木精-伊紅(H-E)染色〕,用顯微鏡進(jìn)一步檢查病變。 病變的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，最后作出病理診斷。
病理切片的制作
1.制作病理切片取材
(1)材料新鮮:取材組織愈新鮮愈好，人體組織一般在離體后，動(dòng)物組織在處死后迅速固定，以保證原有的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。
(2)組織塊的大小:所取組織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部，但根據(jù)制片材料和目的不同，組織塊的較理想體積也不同，如制作病理外檢、科研切片，其組織塊可以薄取0.1~0.2cm即可，這樣可以縮短固定脫水透明的時(shí)間，若制作教學(xué)切片厚取0.3 ~0.5cm，這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。
(3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利，切割時(shí)不可來(lái)回銼動(dòng)。夾取組織時(shí)切勿過(guò)緊，以免因擠壓而使組織、細(xì)胞變形。
(4)規(guī)范取材部位: 要準(zhǔn)確地按解剖部位取材，病理標(biāo)本取材按照各病變部位、性質(zhì)的不同，根據(jù)要求規(guī)范化取材。
(5)選好組織塊的切面:根據(jù)各器官的組織結(jié)構(gòu)，決定其切面的走向?？v切或橫切往往是顯示組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵，如長(zhǎng)管狀器官以橫切為好。
(6)保持材料的清潔:組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等，可用水沖洗干凈后再放入固定液中。
(7)保持組織的原有形態(tài):新鮮組織固定后，或多或少會(huì)產(chǎn)生收縮現(xiàn)象，有時(shí)甚至完全變形。為此可將組織展平，以盡可能維持原形。
2.制作病理切片固定
(1)小塊組織固定法:這是最常用的方法，從人體或動(dòng)物體取下的小塊組織，須立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定，通常，標(biāo)本與固定液的比例為1:4~20，但組織塊不宜過(guò)大過(guò)厚，否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。
(2)注射、灌注固定法:某些組織塊由于體積過(guò)大或固定液極難滲入內(nèi)部，或需要對(duì)整個(gè)臟器或整個(gè)動(dòng)物體進(jìn)行固定。這時(shí)宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管，經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身，從而得到充分的固定。
(3)蒸汽固定法:比較小而厚的標(biāo)本，可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。
最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。
3.制作病理切片脫水透明
   標(biāo)本經(jīng)過(guò)固定和沖洗后，組織中含有較多的水分，必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來(lái)，這一過(guò)程叫做脫水。無(wú)論是用石蠟切片，還是用火棉膠切片，都必須除去組織中所含水分，因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容，常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。
脫水的步驟是:80%、90%、95%各種濃度乙醇2小時(shí)，此過(guò)程可用脫水機(jī)自控完成。
   丙酮也是一種脫水能力很強(qiáng)的脫水劑，但因其脫水能力很強(qiáng)，對(duì)組織有劇烈收縮作用，在制作科研、教學(xué)切片時(shí)一般不用該試劑。因乙醇、丙酮等不溶于石蠟，還要經(jīng)過(guò)一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過(guò)程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。
4.制作病理切片浸蠟、包埋
(1)使石蠟浸入組織中，取代組織中含有的透明劑。
(2)包埋:將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中，石蠟?zāi)毯?，組織即被包在其中，稱蠟塊，此過(guò)程稱為包埋。
5.制作病理切片切片和貼片
(1)修整蠟塊:可視其組織的大小，在組織邊緣約0.1~0.2cm處，切去余蠟部分，否則易造成組織皺縮不平。
(2)準(zhǔn)備好切片用具:切片刀、毛筆、眼科鑷子(彎)、漂烘溫控儀
(3)安裝蠟塊:將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。
(4)安裝切片刀:將切片刀安裝在切片機(jī)的刀臺(tái)上，把刀臺(tái)上的緊固螺絲旋緊，使切片時(shí)不產(chǎn)生振動(dòng)，能保持一定的切片厚度。
(5)切片的厚度:切片機(jī)的厚度調(diào)節(jié)器上刻有0~50μm或0~25μm，可任意選擇其厚度，石蠟切片的厚度一般在4~6μm。
(6)切片
(7)鋪片:用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40~45℃的水面上，借水的張力和水的溫度，將略皺的蠟帶自然展平。
(8)貼片、烘片:待切片在恒溫水面上充分展平后，將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水，置入60~65℃恒溫箱內(nèi)或切片漂烘溫控儀的烘箱內(nèi)烤片15~30分鐘，脫去溶化組織間隙的石蠟。
6.制作病理切片染色和封片
   常用的染色方法是蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin)染色法，簡(jiǎn)稱H.E染色法。這種方法對(duì)任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色，如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等;伊紅是一種酸性染料，可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色，如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。
  H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固
  常規(guī)蘇木素染色中的對(duì)比染色是用伊紅,近年來(lái)在英、美家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對(duì)比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。

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